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全自動(dòng)電位滴定法測(cè)定疫苗佐劑羥值

發(fā)布時(shí)間:2025/12/8   點(diǎn)擊次數(shù):22
 
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一、前言

佐劑是疫苗的一種添加劑,當(dāng)它先于抗原或與抗原混合注入機(jī)體后,能夠增強(qiáng)機(jī)體對(duì)抗原的免疫應(yīng)答或者改變免疫反應(yīng)的類(lèi)型,屬于非特異性的免疫增強(qiáng)劑。隨著現(xiàn)代生物技術(shù)和基因工程技術(shù)的迅速發(fā)展,針對(duì)不同疾病已開(kāi)展了各種新型基因工程疫苗的研制,佐劑尤其是新型免疫佐劑的研究就顯得尤為迫切。

在標(biāo)準(zhǔn) T/CVDA02《復(fù)合礦物油動(dòng)物疫苗佐劑》中,對(duì)于佐劑的質(zhì)量檢測(cè)中有明確規(guī)定測(cè)定羥值含量,本方法參考其中的檢測(cè)方法制定了運(yùn)用電位滴定檢測(cè)的方法。該方法檢測(cè)方便,減少了人為判斷指示劑顏色對(duì)結(jié)果的誤差影響,增加了檢測(cè)精確度,并且提高了檢測(cè)效率,解放操作員的雙手。

二、儀器與試劑

 

2.1、儀器

JH-T6 全自動(dòng)電位滴定儀,PH 復(fù)合電極,水浴鍋,分析天平等。

 

2.2、試劑

?;噭ㄈ?duì)甲苯磺酸 14.4g,  置干燥的 500ml  具塞錐形瓶中,加醋酸乙酯 360ml,振搖使溶解,緩緩加入醋酐 120ml  搖勻,密塞,放置 3  日后備用),吡啶-水(35),氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)滴定液(1mol/L)。

三、實(shí)驗(yàn)方法

3.1、樣品檢測(cè)

準(zhǔn)確稱取 2g 左右樣品,置于滴定杯中,加入 5mL 化試劑,封口膜密封,輕輕搖動(dòng)至溶解。置于 50水浴加熱 25min ,放冷,加吡啶-水(3520mL ,5 分鐘后用氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)滴定液(1mol/L), PH 復(fù)合電極為工作電極,在JH-T6上進(jìn)行滴定至終點(diǎn)。同時(shí)做空白實(shí)驗(yàn)。

設(shè)定滴定儀參數(shù)如表 1 所示:

 1 滴定參數(shù)設(shè)置

滴定模式:

動(dòng)態(tài)滴定

最小添加體積

0.02mL

電極平衡時(shí)間:

4s

預(yù)攪拌時(shí)間:

60s

電極平衡電位:

1mv

滴定速度:

標(biāo)準(zhǔn)

結(jié)束體積:

10mL

相關(guān)系數(shù):

12.69

電位突躍量:

200

補(bǔ)液速度:

5

攪拌速度:

7

滴定前平衡電位:

10mv


 

3.2、圖譜測(cè)試示例

image.png

 

四、結(jié)果與討論

 

4.1、實(shí)驗(yàn)結(jié)果

 

實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表 2 所示:

 2 測(cè)試結(jié)果

 

 

 

樣品批號(hào)

 

 

樣品序號(hào)

 

樣品質(zhì)量/g

滴定液濃度(氫氧化鉀) /(mol/L)

 

滴定體/mL

 

 

羥值(mg/g)

 

 

平均值

 

 

20211201

空白

/

 

 

 

 

 

1.01838

26.225

/

/

1

2.01652

25.475

21.249

 

 

23.301

2

2.01019

25.386

23.802

3

2.01160

25.350

24.851

 

 

20220101

1

2.02788

25.365

24.229

 

 

24.335

2

2.09250

25.326

24.545

3

2.03595

25.361

24.231

 

4.2、結(jié)論

 

本次測(cè)定的動(dòng)物疫苗佐劑的羥值均小于參考標(biāo)準(zhǔn)要求中的 25mg/g),測(cè)試結(jié)果重復(fù)性良好,滿足檢測(cè)要求。

參考文獻(xiàn)

 

[1] T/CVDA02 復(fù)合礦物油動(dòng)物疫苗佐劑[ S ].


 
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