一、前言 佐劑是疫苗的一種添加劑,當(dāng)它先于抗原或與抗原混合注入機(jī)體后,能夠增強(qiáng)機(jī)體對抗原的免疫應(yīng)答或者改變免疫反應(yīng)的類型,屬于非特異性的免疫增強(qiáng)劑。隨著現(xiàn)代生物技術(shù)和基因工程技術(shù)的迅速發(fā)展,針對不同疾病已開展了各種新型基因工程疫苗的研制,佐劑尤其是新型免疫佐劑的研究就顯得尤為迫切。 在標(biāo)準(zhǔn) T/CVDA02《復(fù)合礦物油動物疫苗佐劑》中,對于佐劑的質(zhì)量檢測中有明確規(guī)定測定碘值含量,本方法參考其中的檢測方法制定了運用電位滴定檢測的方法。該方法檢測方便,減少了人為判斷指示劑顏色對結(jié)果的誤差影響,增加了檢測精確度,并且提高了檢測效率,是檢測佐劑碘值的選擇。 二、儀器與試劑 2.1、儀器 JH-T6全自動電位滴定儀,鉑復(fù)合電極,分析天平等。 2.2、試劑 三氯甲wan,韋氏試劑,碘化鉀,硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定液(0.1mol/L)。 三、實驗方法 3.1、樣品檢測 準(zhǔn)確稱取 1.0g 樣品,置于滴定杯中,加入三氯甲wan 30mL 溶解,攪拌均勻,向滴定杯中準(zhǔn)確加入 10mL韋氏試劑,封口膜密封,暗處放置 1 小時,然后加入 15mL 碘化鉀和 10mL 水,在合適的攪拌速度下,插入電極和滴定頭,設(shè)置好參數(shù),用硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定液(0.1mol/L),以鉑復(fù)合電極為工作電極,在JH-T6上進(jìn)行滴定至終點。同時做空白實驗。 設(shè)定滴定儀參數(shù)如表 1 所示: 表 1 滴定參數(shù)設(shè)置 滴定模式: | 動態(tài)滴定 | 最小添加體積 | 0.02mL | 電極平衡時間: | 4s | 預(yù)添加體積: | 25mL | 電極平衡電位: | 1mv | 滴定速度: | 標(biāo)準(zhǔn) |
結(jié)束體積: | 50mL | 相關(guān)系數(shù): | -12.69 | 電位突躍量: | 200 | 補液速度: | 5 |
3.2、測試 圖譜示例 
四、結(jié)果與討論 4.1、實驗結(jié)果 實驗結(jié)果如表 2 所示: 表 2 測試結(jié)果 樣品批號 | 樣品序號 | 樣品質(zhì)量/g | 滴定液濃度 (硫代硫酸鈉)/(mol/L) | 滴定體積/mL | 碘值 (g/100g) | 平均值 | 20211201 | 空白 | / | 0.1009 | 29.850 | / | / | 1 | 1.00511 | 25.623 | 5.3848 | 5.376 | 2 | 1.00073 | 25.555 | 5.4954 | 3 | 1.00228 | 25.743 | 5.2467 | 20220101 | 1 | 1.01762 | 25.968 | 4.8847 | 4.768 | 2 | 1.00668 | 26.334 | 4.4721 | 3 | 1.01217 | 25.939 | 4.9475 |
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